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    山東化學化工學會

    實驗 胡蘿卜素的提取和分離

    瀏覽次數: 342   發布時間:2017-06-30 10:13:51   發布人:editor

       摘要:本實驗利用柱層析法提取和分離了胡蘿卜素,并進行了一些實驗改進,取得了良好 的實驗效果。

      關鍵字:無水Na2SO4 研磨 預處理

      一、貴重儀器

      旋轉蒸發器 一臺

      UV-240型紫外-可見分光光度計 一臺

      電熱干燥箱 一臺

      二、常規儀器

      層析柱(20x700mm) 一根

      鐵架臺 一套

      錐形瓶  500ml 二個

      50ml 五個

      燒杯  500ml 二個

      滴液漏斗   500ml 一個

      量筒  500ml、50ml 各一個

      玻璃棒 100cm 一個

      20cm 二個

      研缽 一套

      滴管 二個

      三、試劑

      80-100目 柱層析硅膠 青島海洋化工廠分廠

      60-90℃ 石油醚 北京化工廠 AR

      乙醇 北京化工廠 AR

      乙酸乙脂 北京化工三廠 AR

      無水Na2SO4 天津市塘沽鄧中化工廠 CP

      1% AgNO3水溶液(自制)

      pH試紙

      胡蘿卜(自備)

      四、實驗步驟

      1、提取

      2、柱層析

      3、結構表征-胡蘿卜素的UV分析

      具體實驗步驟見講義2-3頁有關內容。

      五、實驗記錄及討論

      1、本實驗在提取操作中進行了實驗性嘗試,在研磨過程中加入了3g的無水Na2SO4以增強研磨強度,有利于有效成分的提取。在選用提取液時未使用乙醇,而使用了15ml乙醚,10ml丙酮X2次,10ml石油醚X5次,采用在研缽中加提取劑,研磨,然后傾其上層液體抽濾。這樣避免了將混合物全部倒入漏斗,造成抽濾難以進行的后果。

      2、本實驗中耗時最多的一步操作是硅膠的處理過程:

      第一、硅膠的預處理,我們以濃鹽酸浸泡硅膠14小時,然后用蒸餾水洗滌硅膠4次后,將起進行減壓抽濾,后不斷加蒸餾水沖洗。在1小時之后,抽濾的水呈中性,但仍然含有氯離子。經過4小時不斷的沖洗才使得抽濾液中基本不含氯離子。晾干一周后,在110℃烘箱中活化2小時。

      第二、活化后的硅膠加石油醚浸泡并攪拌均勻。在裝柱時,宜使用口徑較大的玻璃漏斗置于 層析柱上部,注入1/2高的石油醚,打開下部活塞,然后盡量均勻地將硅膠傾入漏斗,這樣可以防止層析柱中形成斷層(這一步是實驗的關鍵步驟)。

      3、柱層析過程中得到了二個顯色帶,第一個帶顯橙黃色,第二個帶顯淡黃色。從加入洗脫劑到收集完第一個顯色帶耗時90分鐘,使用洗脫劑(石油醚/乙酸乙脂=2/1V/V)120ml,收集到約50ml。然后加入95%的乙醇進行洗脫,耗時30分鐘收集到了第二個顯色帶,約有30ml。由實驗可知以極性大的洗脫劑洗脫速度較快,而且收集的顯色帶較集中。如果在層析柱中有氣泡或斷層將影響分離效果,造成顯色帶較寬。

      六、譜圖分析

      1、實驗所得第一個顯色帶為α—胡蘿卜素

      參考數據為:α—胡蘿卜素 473(134896),444(147911),422(104713)

      實驗數據為: 473.20(119490),445.47(137330),425.84(110090)

      2、實驗所得第二個顯色帶呈淡黃色,做旋光分析發現起具有較小的旋光度,可能是β-胡蘿卜素。

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